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LightShift™ 化學發光 EMSA 試劑盒

Thermo Scientific LightShift 化學發光 EMSA 試劑盒是一種非常可靠、靈敏的電泳遷移率變動實驗 (EMSA) 系統，用于鑒定和表征蛋白-DNA 結合相互作用。該試劑盒包括用于設置和定制 DNA 結合反應的試劑、用于檢測試劑盒系統的一組 DNA 和蛋白提取物、用于生物su標記 DNA 靶標的穩定鏈霉su親和素-HRP 偶聯物以及用于檢測的一種極其靈敏的化學發光底物模塊。

LightShift 化學發光 EMSA 試劑盒的特點：

•非常適合檢測細胞核提取物中的低豐度蛋白
• 靈敏度超過放射性和di高辛方法
• 與先前為常用 DNA-蛋白相互作用建立的結合條件兼容
• 包括 EBNA 控制系統以幫助新用戶開發工作檢測方法并了解用于確認結合相互作用特異性的方法

LightShift EMSA 檢測的原理類似于 Western 印跡。生物su末端標記的雙螺旋 DNA 與細胞核提取物或純化因子一起孵育并在天然凝膠上電泳。然后快速（30 分鐘）將 DNA 轉印到陽性尼龍膜上，進行紫外交聯，用鏈霉su親和素-HRP 偶聯物進行探測，并與底物一起孵育。可在一天內完成從標記到得出結果。

蛋白與 DNA 的相互作用是控制許多細胞過程的關鍵，包括 DNA 復制、重組和修復、轉錄和病毒組裝。研究基因調控和確定蛋白:DNA 相互作用的核心技術是電泳遷移率實驗 (EMSA)。

EMSA 技術基于以下觀察結果：在進行非變性聚丙烯酰胺或瓊脂糖凝膠電泳時，蛋白:DNA 復合物的遷移速度比無 DNA 分子慢。因為 DNA 遷移率會根據蛋白結合率發生偏移或速度減慢，因此，該實驗也被稱為凝膠偏移或凝膠延遲實驗。直至 EMSA 蛋白:DNA 相互作用主要通過硝酸纖維素過濾柱結合試驗進行研究。

進行試驗所需的全部是純化的 DNA 靶標，該靶標已用生物su、待測蛋白提取物、尼龍膜和堿性電泳設備進行末端標記。DNA 靶標可以在合成時加上 5' 或 3' 生物su標記，或者在合成后使用 Thermo Scientific 生物su 3' 末端 DNA 標記試劑盒（產品編號 89818）進行標記。細胞核、細胞溶質或全細胞蛋白提取物可以通過多種方法獲得，包括 Thermo Scientific NE-PER 核和細胞質提取試劑盒（產品編號 78833）。

LightShift™ 化學發光 EMSA 試劑盒